五種酶聯免疫ELISA試劑盒檢測方法優缺點對比解釋
日期：2021-12-06 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽：1176 次
中海生物技術為大家解釋五種ELISA試劑zhzbio.com盒酶聯免疫試劑盒檢測方法優缺點對比參照：
| 序號 | ELISA試劑盒檢測方法 | 優點 | 缺點 | 解釋 |
| (一) | 直接法(direct Elisa) | 操作程序短，所以不需要使用二抗，避免了交互反應。 | 實驗中所有的一級抗體都要用酶標記，但并不是每種抗體都適合標記，成本相對較高。 | 抗原總量可通過直接將抗原固定在固體載體上并加入酶標一抗來測定。這種一級抗體的特異性非常重要。 |
| (二) | 間接法(indirect Elisa) | 二抗可以加強信號，不同的測定分析有很多選擇。沒有酶標記的一級抗體可以保持其免疫反應性。 | 互動反應產生概率高。 | 這類方法與直接法相似，但不同的是一級抗體沒有用酶標記，用酶標記的二級抗體鑒定一級抗體來確定抗原的量。 |
| (三) | 雙抗體夾心法(sandwich Elisa) | 靈敏度和特異性高，抗原不用提前純化。 | 抗原務必有兩個以上的抗體結合位點。 | 進行檢測到的抗原包被在兩種抗體之間，在其中一種抗體將抗原穩固在固體載體上，即捕獲抗體。另一種是進行檢測抗體，可以用酶標記后直接測定抗原量。或是沒有標記。隨后用酶標二抗測定抗原量。務必仔細選擇這兩種抗體，以防止相互間反應或競爭相同的抗原結合位點。 |
| (四) | 競爭法(competitive Elisa) | 適用于不純樣品，數據重現性好。 | 整體敏感性和特異性差。 | 樣品中的無抗原抗原與純化并穩固在固體載體上的抗原固定化抗原競爭相同的抗體。當樣品中游離抗原較多時，可以結合較多的抗體，而固定化抗原只能夠結合較少的抗體，相反也是。清洗步驟后，洗去游離抗原和抗體的復合物，只留下穩固抗原和抗體的復合物，與對照組僅穩固抗原的結果做好比較，依據色差可以計算出樣品中的抗原含量。 |
| (五) | 基于細胞法(cell-based Elisa) | 不用裂解細胞，于是靶蛋白損失較少，可以測量完整細胞/貼壁細胞/非貼壁細胞。 | 抗原量無法確定。 | 是一種新的定性蛋白質檢測技術，在其中細胞直接在微孔板中培養。進行檢測時，不用提取蛋白質或裂解細胞，直接測量刺激或抑制后微孔板中蛋白質的變化。 |
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