在ELISA試驗測定方法中有不少因素影響，其實際操作流程還是要遵循相應(yīng)的技術(shù)規(guī)范和要求。除正常反應(yīng)之外，中海在檢查核驗中還常常見到出現(xiàn)假陽性或假陰性結(jié)果問題。以下是中海生物技術(shù)總結(jié)解析做ELISA實驗失敗zhzbio.comELISA試驗不成功的四個關(guān)鍵要點：

ELISA實驗失敗關(guān)鍵要點?標(biāo)本自身的影響:

溶血標(biāo)本和混有紅細(xì)胞的血清經(jīng)ELISA法試驗檢測易產(chǎn)生假陽性。可能是紅細(xì)胞中的血紅素或溶血血清中包含過氧化物酶的紅蛋清，在清洗過程中通常不容易完全洗干凈。它能使過氧化氫釋放原始氧，從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性有色物質(zhì)，即變成藍(lán)色，產(chǎn)生假陽性。造成嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。

ELISA試驗不成功關(guān)鍵要點?標(biāo)本被細(xì)菌病毒感染:

因為細(xì)菌病毒或許包含內(nèi)源性辣根過氧化物酶，被真菌感染的樣品與溶血樣品一致，或許產(chǎn)生非特異性顯色，勢必會影響ELISA實驗測定方法最終結(jié)果。

ELISA實驗失敗關(guān)鍵要點?標(biāo)本儲藏保管不合理:

標(biāo)本在冰箱中放置時長太久，會造成間接ELISA測定本底過深，產(chǎn)生假陽性。為了更好地克服上述影響，ELISA試劑盒測定方法的血清樣品應(yīng)新鮮采集。如無法馬上測定方法，可將五日內(nèi)測定方法的血清樣品儲存在四攝氏度，七天過后測定方法的血清樣品應(yīng)較低溫度冷藏。冷凍儲藏和解除凍結(jié)的標(biāo)本，造成雞蛋白質(zhì)部分集中化，不均勻分布，應(yīng)充分融合后進(jìn)行測量。此時應(yīng)當(dāng)輕輕地融合，無需明顯振蕩。

ELISA試驗不成功關(guān)鍵要點?標(biāo)本凝結(jié)并不充分:

日常工作，偶而為了更好地贏得快速檢測的時長，通常在血液進(jìn)行凝結(jié)前，利用強(qiáng)制離心分離血清，使一部分纖維蛋白原殘留在血清中，中海ELISA測定方法時可產(chǎn)生看得見的纖維蛋白塊，易于產(chǎn)生假陽性最終結(jié)果。于是采集后應(yīng)當(dāng)使血樣充分凝結(jié)，接著進(jìn)行血清分離。

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