伊紅美藍瓊脂培養基EMB原理配方用途方法
日期:2022-04-07 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:2202 次
㈠伊紅美藍瓊脂培養基原理:
伊紅美藍瓊脂培養基算是弱選擇性培養基,英文簡稱EMB培養基,通常用于分離鑒別腸道致病菌,尤其是大腸菌群和糞大腸菌群。蛋白胨供應碳源\氮源\維生素\生長因子等營養物質;乳糖是由大腸桿菌發酵的碳水化合物;磷酸氫二鉀是培養基pH緩沖劑;瓊脂是培養基的凝固劑;伊紅又稱曙紅或四溴熒光素,為酸性染料,美藍又稱亞甲藍,為堿性染料。它們都被用作培養基中的鑒別指示劑,以抑制革蘭氏陽性菌的生長。
大腸桿菌分解乳糖產酸時,細菌帶正電,因此被染成紅色,再與美藍結合,產生紫黑色菌落,有金屬光澤;產氣腸桿菌呈褐色,幾乎沒有金屬光澤。乳糖分解菌/沙門氏菌和志賀氏菌為乳糖發酵微生物,產生無色/透明或琥珀色菌落;凝固酶陽性葡萄球菌是具有無色針尖的菌落;白色念珠菌是蜘蛛絲或羽毛菌落。不致病/乳酸不發酵的革蘭氏陰性菌也會在培養基上生長,需要通過其他的生化試驗來分辨。
㈡伊紅美藍瓊脂培養基EMB配方:
成分(g/L) |
蛋白胨:10.0 |
瓊脂粉:14.0 |
|
氯化鈉:5.0 |
|
伊紅:0.4 |
|
乳糖:10.0 |
|
美藍:0.065 |
|
牛肉浸出粉:3.0 |
|
溫度:25℃ | PH值:7.0~7.4 |
㈢伊紅美藍瓊脂培養基用途方法:
稱取中海伊紅美藍瓊脂培養基干粉37.4g克,添加1.0升蒸餾水或去離子水,攪拌加熱煮沸至完全溶解,在一百二十一度高壓滅菌十五分鐘后備用。
使用中海生物伊紅美藍培養基鑒定水中大腸桿菌,具體操作流程如下所述:
⒈制作伊紅美藍培養基,趁熱注入培養皿,濃縮成平板備用。
⒉取河水或溝水于高溫滅菌錐形瓶中,以1比10稀釋。
⒊在伊紅美藍培養基上接種0.1毫升稀釋液。用劃線平板法分離。
⒋將劃線培養皿倒置,三十七度放置十八至二十四小時。培養基中會出現大腸桿菌菌落,深藍色黑色點有金屬光澤或無光澤。
⒌將菌落接種在斜面培養基上,由營養瓊脂培養基制作而成。
產品鏈接:http://jyqhe.com/product/jypyj-yhmlqz.html
本文鏈接:http://jyqhe.com/news/wenku-embyuanli.html