抗生素檢定培養基I號低PH6.5~6.6檢驗辦法注意事項與實驗操作步驟
日期:2021-11-19 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:962 次
㈠檢定培養基I號檢驗辦法和用途
主要是利用抗生素在中 海瓊脂培養基中的擴散,抑制帶的直徑與抗生素的濃度或活性相關。一種通過比較標準品和測試樣品在接種的測試細菌上產生的抑菌圈大小來判定測試樣品效價的辦法。抗生素檢定培養基Ⅰ號PH6.5~6.6產品符合中國獸藥典標準,適用于磺芐青霉素/拉沙洛西鈉等抗生素效價測定。
㈡抗生素檢定培養基I號注意事項
①灌入的培養基數量不超過二十毫升,要不然存放牛津杯后不能蓋緊板蓋。
②細菌的濃度適合。一旦細菌的濃度太小,細菌層的生長較弱,不能產生抑菌圈。
③菌層培養基表面層一定要光滑細膩,要不然會造成牛津杯泄露。
④壓杯板已經過輻照滅菌,可以直接使用;反復使用后,要用酒精棉擦拭。
⑤將平板遷移到培養箱中培養,輕拿輕放避免 劇烈震動,培養時不可堆積,避免影響到中海生物產品實驗結果。
㈢抗生素檢定培養基I號低PH6.5~6.6實驗操作步驟
①稱量本產品二十六克,加溫攪伴溶化于一千毫升純凈水,116℃滅菌二十分鐘左右。
②細菌懸液的制備。枯草芽孢桿菌/取枯草芽孢桿菌的營養瓊脂斜面培養物,接種到含有中'海營養瓊脂培養基的培養瓶中,在三十五至三十七℃培養七天,用革蘭氏染色法涂片鏡檢。應當超過八十五個孢子。孢子用無菌水洗凈,六十五度加溫半小時左右備用;
③中海取平板,分別灌入二十毫升加溫融化的培養基,放于水平臺上固化,作為底層。還有就是,取適量中 海培養基,冷卻至五十度左右,加入適量指定的試驗菌懸液,混勻。分別添加盤中5ml,均勻鋪在底層,作為細菌層,放于水平臺上冷卻凝固。
④把牛津杯放于盤子里。用無菌鑷子夾住牛津杯正面的凸點,放于菌層培養基表面層,蓋緊壓杯板,輕按牛津杯約五秒鐘,使四個小杯與培養基表面層密切觸碰,避免間隙引起泄露,之后小心地將壓杯板取走。
⑤將標準溶液分別滴入各平板的小管中,遷移至培養箱中三十五至三十七℃培養十四到十六鐘頭,統計實驗最終結果。
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