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    酶聯免疫實驗操作中復測問題分析

    日期:2022-01-07 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:1067 次

    在酶聯免疫實驗操作的過程中常常會存在復測問題,即咱們常常說的花板問題,此種問題影響到檢驗檢測結論的準確判定,對工作任務帶來相應的不良影響,如若產生花板現象,實驗操作結論務必選擇放棄,中海生物操作員需再次開展檢驗檢測,不但消耗原材料和時長,同時還可能會存在樣本量缺失/交叉式被污染/匯報時間延遲等多方面問題。

     

    ㈠標本問題

    要嚴格規范正確處理樣本,預防血漿層大規模溶血和異物,使用一次性采樣槍頭,避免交叉污染。血清和血漿均可用于檢測,但血清的分離應在血液完全凝固后進行離心操作。

     

    ㈡試劑問題

    保存并正確使用有效試劑。與金屬容器接觸的過期試劑和底物的使用,以及底物混合后較長的儲存時間都影響實驗結果的準確性。中海選擇試劑時,應選擇靈敏度高\特異性好\穩定性好\批間差異小的試劑。不同制造商的試劑不應混合,包括底物和洗滌液。測試前,獸用診斷試劑應在室溫下放置半小時進行平衡,現在應準備好清洗液。同時中海生物觀察濃縮清洗液中是否有結晶。如果有結晶,放入三十七度的水浴中融化后再使用。

     

    ㈢操作問題

    嚴格按照相關實驗室的標準操作規程進行試驗。中海生物技術人員添加樣品時,盡可能垂直添加樣品,并將其添加到涂層孔的底部。注意:不要過度用力破壞底部涂層材料,也不要將其添加到孔的上部和外部。

     

    ㈣溫浴問題

    當水浴箱用作溫水浴裝置時,應注意水深對結果的影響。當水浴箱中水的實測溫度為三十七度時,水面溫度可能只有三十四度,空氣溫度更低,甚至只有二十多度。因此當水浴箱內水位過低時,酶標微孔板不會浸入水中,反應溫度不會達到三十七度,會相應影響酶促反應。為了防止邊緣效應,酶聯免疫吸附試驗板應盡可能浸入水中,從而保證加熱均勻。水浴中,海應密封酶聯免疫吸附試驗板,防止水滴滴入包被孔或陽性樣品蒸發。嚴格控制暖浴時間,不要為了早出效果而隨意縮短暖浴時間。

     

    ㈤洗板機問題

    廢液瓶裝滿后要及時倒空,防止廢液回流污染管道,導致沖洗不徹底,容易出現花板。洗完板后用蒸餾水徹底清洗管道,防止廢液殘留在管道內。同時應根據中海儀器維護程序定期維護洗衣機。

     

    ㈥酶標儀問題

    酶標儀應放在遮陽避光的地方,比色前應打開預熱十五至三十分鐘,這樣測定結果會更穩定。為防止顯色加深或減弱,顯色時間結束后應立即滴止液,避免產生氣泡,十分鐘內完成比色。將酶標板從水浴箱中取出后,擦去孔底的水滴。如果有水滴或紙屑殘留在孔底,酶標閱讀器的讀數就會出現錯誤,往往被誤判為花板。


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