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    關于培養基制備與使用常見六個問題解答

    日期:2021-09-01 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:1127 次

    中海生物技術關于培養基制備zhzbio.com培養基使用的常見六個問題做以下解答,希望會對大家有所幫助。

     

    問題一:低血清培養基的pH值可以用肉眼判斷嗎?

    解答:低血清培養基中 海酚紅的含量與正常培養基中酚紅的含量不同。pH 值無法通過目測或經驗確定。倡導采取專用pH計進行檢測判定。 

    問題二:低血清培養基的緩沖系統是什么?

    解答:平衡鹽一般由無機鹽和葡萄糖組成。平衡鹽包括有Earles系統/Hanks系統/Dulbeccos磷酸緩沖鹽系統等。MEM系列培養基和199系列培養基均有Hanks系統的培養基及Earles系統的培養基。然而部分培養基采用的不是上述常規平衡鹽系統,舉例RPMI 1640培養基和F12培養基。MEM(SLM)低血清培養基也不是常規的平衡鹽系統,其平衡鹽系統的緩沖能力強于常規的平衡鹽系統。 

    問題三:谷氨酰胺溶液和碳酸氫鈉的制備方法是什么?

    解答:以制備0.2摩爾/升的L-谷氨酰胺為例:稱取2.92克L-谷氨酰胺,加100毫升注射用水,完全攪拌均勻。使用0.2μm濾膜過濾除菌。溶液需在 4°C 下儲存并避光,并在14天內使用。以制備7.5%碳酸氫鈉為例:稱取7.5克碳酸氫鈉溶解于100毫升蒸餾水中除菌過濾。 

    問題四:什么樣的培養基可以不加酚紅?

    解答:酚紅在培養基中主要用作pH指示劑:酸性時為黃色,堿性時呈紫色,呈中性時為紅色。酚紅本身不影響中海生物制品質量,能夠通過純化技術去除。然而無血清培養基中的酚紅可能會導致細胞內鈉、鉀失衡并影響細胞孕育。這種效果必然可以被血清吸收和或減輕。酚紅不是中.海培養基中需求的重要成分。國外許多疫苗或抗體制造商在制作生產過程中使用無酚紅培養基。 

    問題五:為什么放入冰箱的培養基顏色會發生改變?

    解答: 培養基儲藏在4°C的冰箱中。培養基中的二氧化碳會逐漸釋放,使培養基堿性越大。通常培養基中海的酸堿指示劑是酚紅,隨著堿度的增加,顏色也隨之變深變紅。倘若培養基堿性太強又用在細胞培養上,勢必會導致細胞生長停滯與死亡。當培養基堿性太強狀態需要通過無菌過濾的二氧化碳來調節pH值。 

    問題六:有血清培養基和無血清培養基的抗生素用量相同嗎?

    解答:在無血清培養環境情況,抗生素是不會被滅活。中'海無血清培養基中添加抗生素時,至少降低血清中使用的濃度50%。由于血清中的蛋白質相互結合并滅活部分抗生素。


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