培養基配制的注意事項,步驟及原則 | 培養基的配制和滅菌方法
日期:2023-12-18 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:867 次
培養基的配制步驟和注意事項如下:
步驟:
- 按培養基的配方稱取各種藥品。
- 將各種藥品加水溶解,通常是加所需水量的一半。
- 若配固體培養基,按2%的用量稱取瓊脂,用水將瓊脂浸濕一下,用手擠去瓊脂中過多的水分,加入2的溶液中。
- 加熱至瓊脂全部溶解,并補足所需的全部水量。
- 用1mol NaOH和1mol HCl調節pH至要求值。
- 用分裝器將培養基分裝入試管或三角瓶中,塞上棉塞并包扎,滅菌后備用。
注意事項:
- 加熱熔化瓊脂時,要不斷攪拌,以防糊底。
- 分裝時不要讓培養基沾染試管口或瓶口,以防培養過程中容易污染雜菌。
培養基的配制原則包括:
- 營養成分的配比:碳源和氮源的比例(C/N)要適當。
- 適宜的酸堿度(pH值):配制培養基時pH的調節。
- 滲透壓:營養物質要有適合的濃度。
- 培養基不能反復高溫滅菌。
- 稱不溶性固形物時,應單獨稱,若量少的可以與無機鹽一起稱,但一定要混勻再分裝。
- 一般情況下培養基用自來水配制。
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