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    培養基的設計

    日期:2023-12-22 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:773 次

    培養基營養物質濃度的組成和比列

    培養基的成分確定后,每種營養物質的濃度和比列要合適,要達到微生物生長的最適條件下微生物才能迅速生長。營養物質的濃度太低不能滿足微生物的生長需要,太高又會抑制微生物的生長。比如金屬離子是微生物生長不可缺少的礦物質養分,但如果礦物質的濃度過大就會抑制菌體的生長,甚至殺死菌體。碳氮比(C/N)是影響微生物生長繁殖和代謝積累的重要因素,常作為一個指標來衡量之間的搭配,如在谷氨酸發酵中,當培養基(C/N)比為4:1時,菌體大量繁殖,谷氨酸積累減少;當培養基(C/N)比為3∶1時,菌體繁殖受到抑制,谷氨酸大量增加。一般培養基碳氮比(C/N)100:(0.5-2)

    調節培養基的pH值

    在設計培養基時,除微生物營養物質之間的比列外,pH值也是微生物生長繁殖和代謝積累很重要的一個環境指標。一般來說,細菌適合pH7.0-7.5,酵母菌為3.8-6.0,霉菌為4.0-5.8,放線菌為7.5-8.5。但微生物在生長代謝過程中,由于營養物質的利用以代謝產物的形式積累,有時會引起pH值的變化,因此為了維持培養基pH值的相對穩定,特殊情況下需要在培養基中加入pH緩沖劑,來調節pH值滿足微生物在生長范圍內。如在培養基中常用磷酸鹽(K2HPO4KH2PO4作緩沖劑,因為K2HPO4是堿性,KH2PO4是酸性,當微生物代謝導致酸性物質積累,H+含量增加時,這時的弱堿物質K2HPO4變成了弱酸鹽KH2PO4,溶液的pH值降低不大;反之,OH-增加時,這時弱酸鹽KH2PO4變成了弱堿鹽K2HPO4,溶液的pH值升高不大。

    調節培養基的滲透壓

    微生物的細胞膜是半透膜,在低滲透壓的條件下,當外部環境溶液濃度低于細胞內部環境,水分子會由低滲透溶液進入細胞,導致細胞的膨脹甚至破裂;反之,當外部環境溶液濃度高于細胞內部環境,滲透會迫使水從細胞內部擴散出來,導致細胞皺縮,細胞壁與細胞膜分開質壁分離。因此,微生物只有在等滲的條件下才能生長。所以在配制培養基的過程中,要控制好各營養物質的濃度大小。通常在培養基中適當加入氯化鈉以提高滲透壓。


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