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    ELISA試劑盒挑選注意四個方面

    日期:2022-05-10 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:914 次

    現在科學技術和新興產業的發展,ELISA試劑盒對化學試劑的純度\純度\精密度的需求越來越嚴格和專業化。ELISA試劑盒的挑選很重要,中海生物認為大致有四個方面:

    ?檢測方法

    盡管,ELISA試劑盒的檢測方式方法有很多,我們可以按照自身的偏好來選購。通常ELISA檢測酶促反應的可溶性產物,抗體與相對應的酶結合,反應體系中添加相對應的底物。這樣的酶促反應造成特征顏色,可以用分光光度計檢測。堿性磷酸酶ap也是一類常見的酶。該酶可以與第一抗體或第二抗體結合,同時鏈霉親和素標記的酶也能夠與親和素標記的第一抗體結合。另外ELISA結果還包含放射性檢測/熒光檢測/化學發光或顯色檢測等。

    ?實驗操作形式

    盡管類型諸多,但會出現一項相同的特點,便是抗原捕獲。捕獲的通常形式包含將抗原吸附到微孔板或在微孔板上用抗體捕獲。酶聯免疫斑點和in-cell Elisa是兩種特殊類型。in-cellElisa需要將微孔板培養的細胞固定化/通透化,隨后用抗體原位檢測。酶聯免疫斑點有點像蛋白印跡,先將細胞培養在膜微孔板中,隨后在膜上檢測細胞分泌的抗原,形成斑點。另外中海建議需要按照自身的需要選購九十六孔板或四十八孔板進行Elisa實驗操作。

    ?抗體形式

    單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用作Elisa,但有時候兩者的組合更好。例如雙抗體夾心法,用多抗體捕捉,用單抗體檢測,有時候更有幫助。多抗體可以確保捕獲全部抗原,隨后單克隆抗體可以特異性檢測具有特定表位的抗原。

    ?交叉反應

    假如抗體之間有沖突或交叉反應,會影響所有實驗操作的特異性。抗體來源的相容性是交叉反應的一項原因。盡管從支釘動物身上購買抗體越來越容易,但仍然需要確認是不是會出現交叉反應。用雙抗體夾心法進行Elisa時,檢測用的第二抗體務必對第一抗體有特異性,但無法與捕獲抗體反應。假如檢測二抗和捕獲抗體結合,實驗操作的特異性會大幅度降低。中海通常選購不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗來規避以上問題。


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