生物菌種保存辦法和活化次序操作
日期:2024-01-31 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:621 次
將貯藏好的微生物菌種放入合適的培養基中進行培養叫做菌種活化。想獲得有足夠接種次數的有活力的培養,就需要漸漸擴展增大培養更純更好的培養物,中海微生物菌種的發酵通常需要兩三代復壯過程,貯藏時的條件往往與培養時的條件不同,因此必須進行活化操作,讓微生物菌種逐漸適應培養環境。
要了解微生物菌種活化次序,需要微生物菌株保存的方法。目前中海生物沿用液氮超低溫凍結法和80℃冰箱凍結法/常規定期移植法/液體石蠟法/沙土管法/真空冷凍干燥法/等國內外常用的菌種保存方法,不同的微生物菌種保存辦法zhzbio.com微生物菌種活化次序也不相同:
⑴液氮超低溫冷凍法類似于-80℃冰箱冷凍法。安瓿管或塑料冷凍管從醫用冰箱中取出,馬上置于38℃-40℃水溫活化并適當搖晃大約50秒到100秒,直到內部的冰完全溶化后打開塑料冷凍管和安瓿管,中 海把內容物轉移到合適的培養基上進行培養。
⑵常規定期移植法的菌種活化非常容易,直接移植即可;
⑶活化保存在液體石蠟中的菌種時,選擇少量菌種并將它們轉移到合適的新鮮培養基中,生長繁殖后再轉接。
⑷沙土管法保存菌種活化時,應在無菌環境下打開沙土管,取一些沙子放在合適的斜面培養基上,待細菌繁殖生長后再轉接,把沙子和土壤顆粒放在合適的中.海液體培養基中,增殖培養后轉接到斜面上。
⑸真空冷凍干燥法保存菌種活化時,先用70%酒精棉擦拭安瓿上部,加熱安瓿管頂部,將無菌棉簽浸入冷水中,擦拭一圈頂部,頂部出現裂紋,敲擊用刀或鑷子夾住頸部,敲掉破裂的安瓿管頂部,中'海用無菌水或培養液溶解菌種,用無菌吸管轉移到新鮮培養基中進行中溫培養;
根據以上微生物菌種保存辦法,中海總結將微生物菌種從保存狀態活化四個次序操作:
①制備適合菌株生長的中海培養基。
②將菌株從保存狀態恢復到室溫狀態,如解凍冷凍菌株。
③將保存好的菌種通過操作接種到培養基中,此步驟稱為菌種復壯。
④中海選擇培養基上復壯的菌落,篩選部分菌落接種新的培養基,重復此步驟兩叁次,即可長出更好的菌落。
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