第一種方法：常規(guī)微生物菌株貯存

此方法操作非常簡單，直接貯藏在普通冰箱中，并且可以在微生物學實驗室中使用。此法缺點是微生物菌株保留時間短、傳代頻繁，并且菌株易于突變。  

第二種方法：半固體穿刺貯存

通過穿刺接種法把中海細菌培養(yǎng)物接種到半固體培養(yǎng)基中，在二十四小時培養(yǎng)后，加一層無菌液體石蠟，厚度約壹厘米，并保存在冰箱中。腸桿菌和葡萄球菌等，通常可以保存三個月至半年時間。當需要繼代培養(yǎng)和移植時，傾斜半固體應變管以使液體石蠟流到一側，然后將細菌轉移到中海培養(yǎng)基zhzbio.com中。將少量液體石蠟放在高濃度醫(yī)用消毒酒精中的接種環(huán)上，然后進行燃燒消毒，以避免直接在酒精燈上燃燒，液體石蠟會濺到周圍并造成污染。如果保存副溶血弧菌，則可以添加氯化鈉制成3.5高鹽半固體，在室溫下它可以保存壹個月。  

第三種方法：沙管貯存 

適用于產(chǎn)生孢子的細菌，將篩分的中性細沙干燥，放入約一厘米高的小試管中，用棉塞塞好，然后消毒并干燥以后使用。用無菌生理鹽水洗滌掉中.海生物培養(yǎng)基上的細菌培養(yǎng)物以使細菌懸浮。然后吸取約半毫升的這種細菌懸浮液，并將其倒入砂管中，以使沙子完全潤濕。塞上棉塞，放入干燥器中瀝干水分。然后將其置于氯化鈣吸收干燥劑瓶并保留在冰箱中以備后用。使用時可以在適合的培養(yǎng)基上接種沙子接種環(huán)。    

第四種方法：斜面貯存 

普通瓊脂斜面貯存方法：普通瓊脂斜面可接種葡萄球菌，腸桿菌和其他不需要高營養(yǎng)的細菌，底部應加入少量無糖肉醬防止干燥，但應將Proteus OX和傷寒bar O菌株接種在干燥的瓊脂斜坡上，以防止突變。將其用橡膠塞塞緊，在經(jīng)過孵育后，將其存儲在冰箱中，該冰箱通常可以存儲貯存菌株三個月或半年。 

血液瓊脂斜面貯存方法：鏈球菌和血瓊脂斜面上應接種肺炎球菌和其他營養(yǎng)要求高的細菌。經(jīng)過培養(yǎng)和生長，請存放在冰箱中。鏈球菌必須每15-30天移植壹次，肺炎球菌必須每四天移植一次。 在傾斜的浸入液中加入無菌液體石蠟，然后超過約壹厘米，存放在冰箱中。此方法用于存儲含有Vi抗原的沙門氏菌，而其他含有表面抗原的細菌則可以存儲90-180天。

呂氏血清斜面：白喉棒狀桿菌可以存儲在這種中 海培養(yǎng)基上，其成分為1份pH7.4的葡萄糖肉湯，三份無菌牛血清或兔血清。白喉棒狀桿菌在這種培養(yǎng)基上快速生長旺盛，并且細菌的形態(tài)是典型的。如果將5~10%中性甘油添加到中'海培養(yǎng)基中，則培養(yǎng)的白喉棒狀桿菌異色顆粒將更加明顯，并且它們將在一天后老化并變成多態(tài)性，幾乎沒有差異。染色后的顆粒，細菌體大三四倍，放在冰箱中可以保存14-30天。

第五種方法：冷凍貯存 

中海實驗室必須配備低濃度的溫度低于零下二十度的冰箱，中海生物技術人員提示：冰箱的溫度越低，保存時間就越長。  

第六種方法：濾紙片超低溫貯存菌種 

切開新華濾紙放入3毫米x 3毫米的容器中，對其進行高壓滅菌，然后將其放入裝有蓋的半毫升無菌塑料離心管中，以供使用。分離并純化要保留在血板上的細菌后，使用無菌鑷子夾住濾紙，將大量細菌刮在板上，然后將其放入塑料離心管中，然后可以將一根離心管放進去。幾十張帶有細菌的濾紙，然后蓋上蓋子，用膠帶將蓋子密封好，并注明患者的姓名，細菌名稱和保存日期。將塑料管放入零下七十度冰箱中。使用時，從塑料離心管中取出一個細菌，將其放入富集肉湯中，孵育十八至二十四小時，然后將細菌懸浮液轉移至血平板中。此方法適合于保存不需要高營養(yǎng)的細菌，但不適合保存更為嚴格的微生物菌種。  

第七種方法：商品化的微生物菌株貯存管 

每個保藏管包含二十至二十五個珠子和緩沖液。使用時，將菌落放入緩沖液中，混合，吸取緩沖液，然后將其在零下十度冰箱中保存十年，然后可以在零下二十度冰箱中保存一至三年。恢復時只需要將珠子放入肉湯中或在板上滾動即可。商業(yè)菌株保存管操作簡單，但價格昂貴。中海生物期望隨著經(jīng)濟的發(fā)展及實驗室條件的不斷發(fā)展和完善，將有更好的生產(chǎn)設備使用。  

第八種方法：菌株的細菌識別卡貯存 

此方法適用于使用VITEK自動微生物識別儀的實驗室。方法是直接在識別卡上標記識別卡并將其存儲在零下二十度冰箱中。進行復蘇時，將識別卡直接從零下二十上升至零上三十五度，并等待直至小孔液體完全融化。使用注射器按照無菌步驟將陽性生長孔中的液體吸出，將其放在合適的板上，然后將其放在培養(yǎng)箱中放置一至兩天。該方法的生化卡中的細菌被反復冷凍和融化五次并分離產(chǎn)生的細菌是相同的。金黃色葡萄球菌，腸桿菌和念珠菌的生存時間不少于兩年半;腸球菌，黃桿菌和不動桿菌的生存時間不少于一年半，鏈球菌和假細菌的生存時間，莫納斯的生存時間不少于十個月。

第九種方法：濕牛奶冷凍貯存

原料保護性牛奶的制備：將鮮牛奶反復通過吸收性棉過濾三次，用十磅的高壓釜滅菌十分鐘，并保存在冰箱中以備后用。關于菌種管的處理：首先在清潔溶液中浸泡一天，然后用清水沖洗，然后在蒸餾水中浸泡過夜以達到中性，然后用棉塞塞住噴嘴，并高壓滅菌十五磅壓力，持續(xù)半小時以供使用。方法將各種細菌種植在生長良好的平板培養(yǎng)基上，純化后，將它們在培養(yǎng)箱中孵育十八小時，然后用制備的保護性牛奶清洗苔蘚，然后用無菌毛細管滴管吸取細菌懸液。將液體倒入菌株的球莖中，每個球莖中大約一半的細菌，然后火焰密封，并保存在零下二十度冰箱中。抵抗力強的細菌可以保存至少36個月，抵抗力弱的細菌可以保存不少于24個月。

第十種方法：冷凍真空干燥貯存 

這種方法是最好的方法目前用于保存菌株。其優(yōu)勢特點是應用廣泛性。除了一些不產(chǎn)生孢子而僅產(chǎn)生菌絲體的絲狀真菌外，不適合該方法貯存，其他主要類型的微生物如細菌/放線菌/酵母/絲狀真菌和病毒也可以通過該方法貯存。有著保存期長，成活率高的特點。實際應用中，在真空冷凍干燥的安培管中保存的真菌的生存期長達四十年，通常微生物菌種可以保存不少于十年。在保存期間，微生物菌種貯存可以避免被其他細菌污染；它易于攜帶和運輸，并且易于實現(xiàn)商業(yè)化生產(chǎn)。其缺點是需要某些設備，冷凍真空干燥器以及繁瑣的操作。傳統(tǒng)上使用過濾管將玻璃過濾管改為帶蓋的半毫升塑料離心管。將塑料離心管放入耐高壓塑料離心管盒中，用雙層報紙包好，用高壓蒸汽滅菌十五磅十五分鐘，然后放入烤箱干燥八十分鐘。在凈化工作臺中，將用脫脂奶洗過的濃稠細菌懸浮液添加到帶有長毛細管玻璃滴管的塑料離心管底部，每次約五分之一毫升，切記不要用離心機污染離心管口。牛奶用添加的細菌液體離心，將試管箱在零下二十度的冰箱中預冷凍。預冷凍后，將離心管箱放入冷凍干燥機的干燥箱中進行冷凍干燥。冷凍干燥后，在不抽真空的情況下將離心管蓋壓入純化工作臺。標簽和密封用膜密封離心管的嘴并存放在零下二十度冰箱中。

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