斜面/液體/半固體培養基移種方法
日期:2022-07-12 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:1703 次
本文歸納斜面培養基移種方法,液體培養基移種方法,半固體培養基移種方法。
A、斜面培養基移種技術
㈠材料
瓊脂斜面培養基;經分離培養的平板培養物。
㈡方法
①在瓊脂斜面培養基試管上部注明移植菌名稱或編號/接種日期/接種者組別及編號。
②左手握住裝有細菌的平板底部,右手握住接種環。接種環在火焰上滅菌冷卻后,蘸取平板線上發育良好的隔離菌落。將平板放回原位,馬上用這只手拿起斜面培養基斜握。用右手小指和手掌握住衛生棉條,輕輕旋轉,然后拔出衛生棉條,用火焰對噴嘴進行消毒。
㈢將接種環伸入斜面培養基管底部的固化水中,沿斜面培養基表面自下而上畫一條直線,再自下而上畫一條連續的折線;不要畫直線,就畫曲折線。取出接種環,用火焰消毒噴嘴,塞上棉塞,放在試管架上,火焰消毒后放下。
如果移植到斜面培養基上的細菌在斜面培養基上或液體培養基中生長,中海生物技術人員用左手斜握菌種管和斜面培養基管,同時用右手無名指和小指掌拉起并夾住兩個棉條。對噴嘴接種環進行火焰滅菌,從菌種管中取出的細菌立即移植到斜面上,塞好棉塞,火焰滅菌后放下接種環。然后,斜面培養基在37℃培養箱中培養二十四小時。結果斜面上形成菌苔。
B、液體培養基移種技術
用于富集純菌,觀察液體環境中細菌的生長特征:混濁生長、表面生長或沉淀生長。
㈠材料
肉湯培養基;斜面培養物(大腸埃希菌、化膿性鏈球菌、枯草芽胞桿菌)
㈡方法
①取接種環,在火焰上灼燒滅菌,冷卻。
②雙管移植法左手持細菌斜面培養和肉湯培養基兩個試管,右手持接種環,按無菌操作辦法取少量細菌。在靠近液面的傾斜管壁上輕輕涂抹、研磨接種環,試管直立,使管壁上附著的細菌浸入液體中。接種后,放入37℃培養箱中培養。
㈢結果
①混濁生長大腸桿菌溶液呈均勻混濁,管底有少量沉淀。
②化膿性鏈球菌菌液管底有沉淀,菌液無明顯混濁。
③菌膜生長:枯草芽孢桿菌液體表面形成一層膜。
C、半固體培養基移種技術
用于保存細菌和間接檢查細菌是否有能力。
㈠材料
半固體培養基;細菌斜面培養物。
㈡方法
①接種針經火焰滅菌冷卻后,斜面培養表面有細菌染色。
②無菌法穿刺接種,將接種針插入半固體培養基中央,在距管底0.5cm處停止,然后按原路線退出。穿刺拔出時注意防止接種針在穿刺線外擺動。
③用火焰消毒試管口,并用棉塞塞住。接種用針焰滅菌。培養物在37℃培養箱中培養。
㈢結果
有動力的細菌擴散,而無動力的細菌沿穿刺線生長。
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