實驗室支原體污染檢查驗證六種鑒別辦法簡述
日期:2021-08-20 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:1166 次
第一種:分離培養法
支原體的致病性檢測為主要通過從受污染的細胞組織中分離培養支原體來確定。分離培養法是支原體污染檢測最可靠最準確的方法。然而支原體對環境的影響非常敏感,極易被滅活,分離培養操作相對麻煩并且檢測周期長。通常只能對支原體污染檢查進行定性觀察。分離和培養方法常用于輔助支原體常規檢測中的其他檢測方法。
第二種:DNA熒光染色法
DNA熒光染色法相比分離培養法減少了檢查驗證時長,常用于細胞培養中污染支原體的檢測。DNA熒光染色法是基于熒光染料可以與支原體DNA中的AT堿基富集區結合的原理。中海檢查被支原體污染的細胞染色后,在細胞核外和細胞周圍可以看到許多大小均勻的組織。
第三種:ELISA酶聯免疫吸附試驗
ELISA一般用于檢測支原體污染檢驗,具有良好的特異性和靈敏度高,可統一完成大量樣品的檢測,擁有快速定量定性簡單檢測等諸多特點。
第四種:PCR技術
PCR有著快速靈敏特異簡便的基因診斷技術,PCR檢測技術已被用于科學研究和疾病診斷等支原體污染鑒別,其可統一檢測大批量樣本,其有周期短/靈敏度高/特異性好/操作簡單等優點。中海生物依據支原體基因組中的保守序列設計特異性引物,對待測樣品的核酸進行擴增,通過分析擴增產物的大小進行診斷。
第五種:電子顯微鏡
通常細胞培養需兩至三天時間,在細胞接近結合前,將細胞胰酶消化制成細胞懸液,然后用電子顯微鏡在觀察前采用固定嵌入和分段等流程。
第六種:定時周期性檢查
通常情況支原體感染會使培養的細胞逐漸滅亡,所以對培養的細胞進行定期支原體檢測非常重要。支原體污染檢查驗證重點是對實驗室細胞培養進行常規支原體污染檢測的規范化,做到每30~90天做一次支原體檢查驗證。
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