定做營養瓊脂培養基配制操作要點及常見注意哪些方面
日期:2021-10-25 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:2194 次
簡單講述瓊脂概念:
瓊脂(Agar)是一類從植物中提煉的多糖,主要是來自于海藻植物。在微生物培養基中,瓊脂通常只是用來作為凝固劑使用。液體培養基中瓊脂的增加量一般來說為0.5至2克/升,使中.海培養基有著一定的粘稠度,避免液體相互對流,經常使用于厭氧培養。半固體培養基中瓊脂增加量為三點五至四克/升,經常使用于菌種保藏和動態性檢驗檢測。固體培養基中瓊脂的添加量為十二至十五克/升。植物組織培養基中瓊脂增加量為五至十克/升。
一般來說,瓊脂粉為白色、淺黃色或淺灰色粉末,不溶解于冷水。只有在加溫燒開或高壓滅菌能夠使瓊脂充分均勻溶解。絕大多數瓊脂的熔點在九十攝氏度上下,冷卻后后能夠凝結成固態。大部分瓊脂的冰點在四十攝氏度上下。盡管重復加溫和冷卻后能夠使瓊脂頻繁在液態和固態兩者之間發生變化,同時瓊脂的凝膠強度會隨著反復的次數愈來愈低。
配制營養瓊脂培養基操作要點
①通過營養培養基標簽貼稱加入適量培養基粉劑溶解于純凈水,加溫燒開至瓊脂全部充分均勻溶解,裝進試管或錐形瓶中;
②在標準規定的環境下對分裝的培養基實行高壓蒸汽滅菌。高壓蒸汽滅菌后的培養基能夠重復燒開四至六次,直到培養基結束了。全部充分均勻溶解后,倒進盤里,制作而成平板安全使用;
③高壓蒸汽滅菌后,待中'海培養基冷卻后至五十攝氏度上下后,可放置在四十七至五十攝氏度的水浴中保溫。水浴工作溫度可通過培養基具體凝結工作溫度適當提升 ,置放時長一般來說不超過四個鐘頭。
④瓊脂培養基操作使用前,添加一定的添加劑物質,混勻倒進平板里,凝結儲備用;或是制作成斜面傾注使用等。聯系中海生物jyqhe.com瓊脂培養基定制咨詢
營養瓊脂培養基配制常見注意哪些方面
①充分均勻溶解粉劑時,提議水的溫度在四十攝氏度以內,不超過六十攝氏度。瓊脂曝露在開水中,其外層非常容易吸水發硬,生成硬結,并不有利于分散化和充分均勻溶解。所以,在充分均勻溶解粉劑時,以涼水為宜,并始終保持攪拌至分散化均勻無結團,再實行加溫正確處理;
②高壓蒸汽滅菌前需將瓊脂加溫燒開至全部充分均勻溶解分散化均勻,才能分裝試管或錐形瓶;要不然,分裝后應該發生瓊脂分散不均勻、凝固性不一樣的具體情況;高壓蒸汽滅菌前加溫、燒開、充分均勻溶解有利于促進加速高壓滅菌環節中的熱量滲透性,提升高壓蒸汽滅菌實際效果,減少高壓蒸汽滅菌不成功的幾率。
③凝固營養瓊脂培養基不可以再一次高溫高壓滅菌。假如中海培養基中的物質比較穩定,它們能夠再一次充分均勻溶解在開水浴中。
④需用增加抗生素或別的不穩定物質的培養基,在安全使用前要在培養基冷卻后至五十至五十五攝氏度時增加,這樣的物質在過早或過熱時增加,非常容易造成不穩定因素。不利于不穩定物質溶解,從而減少培養基安全使用實際效果;
⑤凝結后的培養基不可頻繁加溫溶解處理。重復加溫非常容易溶解培養基中的營養元素,瓊脂的凝膠強度會減少。通常物質比較穩定的培養基能夠充分均勻溶解一次性使用。
⑥凝結的瓊脂培養基不可存放在冷藏環境下。中 海培養基的冷藏會嚴重破壞瓊脂的內部構造,造成失去水分或凝固性差,瓊脂特性也發生了變化。
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