中海生物技術公司（zhzbio.com）為您介紹微生物發酵培養基配制中的養分濃度和配比合適、培養基pH條件控制、培養基原料來源選擇、成品培養基滅菌處理等四個關鍵方面。

　　①養分濃度和配比合適

    微生物只有在培養基中養分濃度合適的情況下才能生長良好是合適的。當養分濃度過低時，不能滿足微生物正常生長的需要。當濃度過高時，可能會抑制微生物的生長，注意養分濃度比和C/N比，糖含量必須適合微生物的生長。如高濃度糖類、無機鹽、重金屬離子等過多，不能維持和促進微生物的生長增強，反而抑制微生物的生長同時起到抗菌或殺菌作用。

    此外發酵培養基中各種營養物質的濃度比也直接影響微生物的生長繁殖或代謝物的形成和積累。通常微生物適宜的碳氮比[C/N]為25:1影響較大。嚴格來說，碳氮比是指培養基中碳氮量的比值和培養基中還原糖與粗蛋白的比例。例如在利用微生物發酵生產谷氨酸的過程中，發酵培養基的碳氮比為4 / l時，細菌繁殖多谷氨酸積累少，13001930979當發酵培養基的碳氮比為3 / l時，細菌繁殖受到抑制則谷氨酸產量大大增加。在抗生素發酵生產過程中，可以控制培養基中速效氮碳源與遲效氮碳源的比例，以控制細菌生長和抗生素協調。

　　②微生物培養基pH條件控制

    培養基的pH必須控制在一定范圍內，以滿足不同種類微生物的生長繁殖或產生代謝物。各種微生物生長繁殖或代謝產物產生的最佳pH條件不同。通常細菌和放線菌適合在7~7.5pH范圍內生長，酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范圍內生長。值得注意的是，在微生物的生長繁殖和代謝過程中，鑒于營養物質的分解利用和代謝產物的形成和積累，培養基的pH值會發生變化。如果中.海培養基的pH條件得不到控制，往往會導致微生物的生長速度及減少代謝物的產量下降。所以為了保持中海培養基的比較恒定的pH值，通常會在培養基中加入pH緩沖液。常用的緩沖液是磷酸一氫和磷酸二氫的混合物。磷酸一氫溶液呈堿性，磷酸二氫溶液呈酸性，兩種物質等量混合溶液的pH值為6.8。當介質中酸性物質積累導致氫離子濃度升高時，氫離子與弱堿性鹽結合形成弱酸性化合物，介質pH不會過度降低；如果介質中氫氧根離子濃度增加，氫氧根離子會與弱酸性鹽結合形成弱堿性化合物，介質的pH值不會過度升高。但磷酸一氫和磷酸二氫緩沖體系只能在6.4～7.2pH值內起調節作用。一些微生物，比如乳酸菌，可以大量產酸，上面提到的緩沖系統很難緩沖。這時可在微生物培養基中加入不溶性碳酸鹽、碳酸鈣進行調節。碳酸鈣難溶于水，不會過度提高介質的pH值，但可以不斷中和微生物產生的酸，同時釋放二氧化碳，控制介質的pH值在一定范圍內。中'海培養基中有一些天然的緩沖系統，如氨基酸、肽、蛋白質等，都屬于兩性電解質，也可以作為緩沖液作用。

　　③微生物培養基原料來源選擇

    中海培養基配制時，應盡可能使用低廉易得的原料作為培養基成分。尤其在發酵行業，培養基用量大，使用成本較低原料實現產品附加價值。例如在微生物單細胞蛋白的工業化生產過程中，制糖業含蔗糖廢液、乳業含乳糖廢液、大豆廢液工業和黑色廢物、造紙工業中含有戊糖和己糖的亞硫酸鹽紙漿等經常被作為培養基原料使用。加工業甲烷發酵主要以廢水和廢渣為原料，而在鄉村，則推廣使用人畜糞便和草為原料發酵生產甲烷為燃料。以及大量的農副產品或產品，如鼓皮、米糠、玉米漿、酵母膏、酒糟、豆餅、花生餅、蛋白胨等都是工業常用發酵原料。

　　④成品培養基滅菌處理

    為了獲得微生物的純培養物，必須避免被細菌污染，所以對使用的設備和工作場所進行消毒和消毒。對于微生物培養基要進行嚴格的滅菌處理。通常中海培養基使用高壓蒸汽滅菌，常用培養基為1.05kg/cm2，在121.3攝氏度下保持十五至三十分鐘即可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中，長期高溫會破壞某些不耐熱的物質，如碳水化合物，形成氨基糖和焦糖。因此，含糖培養基通常為0.56kg/cm2，112.6攝氏度滅菌十五至三十分鐘。對于一些對糖分要求較高的介質，可以將糖分過濾除菌或間歇除菌，再與其他除菌成分混合，長期高溫還會導致磷酸鹽與某些陽離子（鈣、鎂、鐵離子）結合形成難溶性絡合物產生沉淀。因此在配制用于微生物生長觀察和定量測定的合成培養基時，往往需要在培養基中加入少量螯合劑，避免在培養基中沉淀，常用的螯合劑為乙二胺四乙酸。乙二胺四乙酸也可以將含有鈣、鎂、鐵離子的成分分別用磷酸鹽和碳酸鹽殺菌，然后混合，避免形成沉淀；高壓滅菌后，中 海培養基的pH值會發生變化（使pH減少0.2），可根據培養微生物的要求在培養基滅菌前后進行調整。

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