在平板實驗操作的過程中，常常會碰到用細菌病毒接種平板后沒有菌落生長發育的現象。中海生物技術小編來探討一下出現這種現象的菌種原因和培養基及添加劑原因和技術人員操作方法原因等三種因素進行分析解釋。

㈠菌種方面的因素:

①菌株沒有完全激活

在我們得到一種菌株時，該菌株常常處在存儲情況，這就所需小編按照其合理的培養基一代一代地擴展培育，以得到充沛的菌株，因此完全活化的目的是使該菌株漸漸適應培育必要條件，進而在平板上迅速生長發育。

②應變衰老

假如菌株連續多次傳代培養高于十多次乃至數十次，會造成菌株衰老，生長發育遲緩乃至不生長發育。

③野生菌株

與標準規范菌株相比較，一部分野生剝離菌株較為敏感脆弱，營養成分所需較高，對外部欠佳必要條件比較敏感，無法在普通平板上生長發育，常常所需加入特殊的營養元素。

④選購的商業化的菌株

一部分商業化的菌株，如復合益生菌/菌肥/食用菌菌種等，都歷經了基因改造，又不可以連續傳代培養和擴展，因此難以在平板上生長發育。

⑤試樣中的細菌病毒

部分試樣含菌量較少，如水樣和供試品溶液，接種量低造成平板無菌生長發育。一部分試樣富含一部分抑菌其成分，會殺死試樣中的細菌病毒，造成平板無菌生長發育。

㈡技術人員操作方法不規范的因素：

①實驗操作實際操作中的出現失誤，尤其是溶解稀釋菌液的過程中，盡量少用或不用菌。

②中海培養基制備的過程中稱取量重不規范，添加劑配置比例不規范等。

③器皿沒有洗干凈，鑒于殘余抑菌其成分，細菌病毒沒有生長發育。

④過分殺毒滅菌，中 海培養基的許多其成分不耐高溫，過分殺毒滅菌會造成其成分不起作用。

⑤不規范的酸堿度上下調整，培養基的酸堿值在不一樣的環境溫度下會不盡相同，假如酸堿值上下調整不規范，細菌病毒就不易生長發育。

⑥沒有合理的培育必要條件，按照其不一樣細菌病毒對氧氣的所需狀態，可以可劃分為需氧/厭氧/微需氧培育。按照其不一樣細菌病毒的環境溫度所需，可在25℃/30℃/35℃/42℃/56℃等不一樣環境溫度下培育。

㈢培養基和添加劑的因素：

①培養基和添加劑高于有效期或臨近有效期，營養元素有某種狀態的不起作用，造成細菌病毒不生長發育。

②特殊專用培養基和添加劑未妥善處理存儲/未遮陰/冷藏/嚴密密封存儲等，因此造成出錯。

③中.海培養基的酸堿值發生了轉變，一部分特殊的制成品培養基的酸堿值會伴隨著時長出現某種狀態的轉變，因此在使用前所需從新修整酸堿值，要不然細菌病毒不易生長發育。

④制成品培養基自身品質欠佳，如原料純度低/富含抑菌其成分/原料間配置比例不規范等，會造成中海生物培養基質量不過關。

⑤培養基和添加劑沒有營養成分或不適宜培育部分菌株。部分菌株有特殊的的營養成分所需，所需加入一部分特殊的的營養元素才可以生長發育。

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