生物緩沖液(PBS、HEPES)優缺點對比
日期:2022-06-10 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:1627 次
生物緩沖液能有效穩定水溶液的pH值,所以被大量應用于生物實驗中。殊不知,以往常用的傳統緩沖液,如碳酸鹽緩沖液和磷酸鹽緩沖液,不適用來某些生物實驗中。這些試劑在pH7.5以上不能有效緩沖,會形成某些干擾反應。所以,1966年NormanGood博士等人提出了一系列兩性離子緩沖液,可以解決傳統緩沖液的局限性。這些緩沖液的pKa值等于或接近生理pH值,對細胞無毒,不會被細胞膜吸收。在此中海生物技術小編簡述一下經常使用的PBS緩沖劑和HEPES生物緩沖液優缺點。
生物緩沖液(PBS、HEPES)優缺點對比
PBS | HEPES | |
有效的pH范圍 | 5.8-8.0 | 6.8-8.2 |
生物毒性 | 不具生物毒性 | |
滲透壓 | 具備等滲透壓的特性,可防止細胞破裂。 | 使用 0.1 M HEPES 顯著提高了培養基的滲透壓。 |
細胞活力 | PBS 稀釋的細胞培養樣品可能會無意中降低細胞活力。 | HEPES 緩沖系統中可以看到更高的最大細胞密度和活力。 |
與金屬離子的關系 | 與部分金屬離子結合會產生絡合物或沉淀。 | 可以忽略不計的金屬離子產生絡合物或沉淀。 |
與酶促反應的關系 | 可能會抑制酶促反應 | 適合用于酶促反應 |
HClO熒光檢測 | 適用 | 不適用 |
在冷凍情況下的變化 | PBS 溶液的冷凍導致顯著的 pH 變化。 | HEPES 溶液的冷凍不會導致 pH 變化。 |
用于電子顯微鏡研究的前綴固定劑 | 由于磷酸鹽與二價陽離子有關。較高濃度的PBS會導致嚴重沉淀,從而阻止細胞有效過濾到過濾器上使用 | Hepes 代替 PBS 避免了這種沉淀 |
用于層析法 | 于層析法中適用 | |
高壓滅菌 | 可以高壓滅菌 | 不可以高壓滅菌 |
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