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    禽流感(H9 亞型)血凝抑制試驗陽性血清使用說明書

    日期:2023-12-05 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:852 次

    【獸藥名稱】
    通用名稱:禽流感(H9 亞型)血凝抑制試驗陽性血清
    商品名稱:無
    英文名稱:Avian Influenza Virus (H9 subtype) positive
    Serum of Blood Hemagglutination Inhibition Test
    漢語拼音:Qiuliugan(H9yaxing)Xueningyizhishiyan
    Yangxingxueqing
    【【主要成分與含量】本品系用禽流感病毒(H9 亞型)感染 SPF
    雞制備,效價≥1:128(即 27
    【性狀】微黃色或淡紅色澄清液體,久置后有少量沉淀。
    【作用與用途】用于禽流感(H9 亞型)病毒血凝抑制(HI)試
    驗陽性對照
    【用法與判定】
    1 材料
    移液器及吸頭、1/15mol/L PBSpH 7.0-7.2)、96 孔微量血凝
    板(V 型)、1%V/V)雞紅細胞懸液、加樣槽等。
    2 試驗操作
    2.1 血凝試驗(HA
    96 孔微量血凝板 1-12 孔加入 PBS 0.025ml,取禽流感(H9)血
    凝抑制試驗抗原 0.025ml 加入第 1 孔中,反復稀釋 510 次混勻,從1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔,稀釋混勻取 0.025ml 加入第 3 孔,
    依此倍比稀釋至第 11 孔。每孔加入 PBS 0.025ml,再加入 1%V/V
    雞紅細胞懸液 0.025ml。第 12 孔為紅細胞對照孔。將血凝板震蕩混勻,
    室溫放置 1540 分鐘。
    2.2 配制 4 個血凝單位抗原(4HAU
    依據血凝效價,配制 4 個血凝單位抗原(4HAU)。舉例:血凝效
    價為 1:128,即 128/4=32(即稀釋倍數為 1:32)。取 PBS 9.0ml,加入抗
    1.0ml,(即成 1:10 稀釋)震蕩混勻取 1.0ml,加入 2.2ml PBS 中,
    使最終濃度為 1:32。對其血凝價進行回歸檢驗后,28℃存放待用。
    2.3 血凝抑制試驗(HI
    96 孔微量血凝板 1-11 孔加入 PBS 0.025ml,第 12 孔加入 PBS
    0.05ml,取本品 0.025ml 加入第 1 孔中,反復稀釋 510 次混勻,從
    1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔,稀釋混勻取 0.025ml 加入第 3 孔,
    依此倍比稀釋至第 10 孔。取 4HAU 1-11 孔每孔加入 0.025ml,血
    凝板震蕩混勻,37℃作用 20 分鐘。再每孔加入 1%V/V)雞紅細胞
    懸液 0.025ml。第 11 孔為 4HAU 對照孔,第 12 孔為紅細胞對照孔。
    將血凝板震蕩混勻,室溫放置 1540 分鐘。
    2.4 結果判定 將血凝板傾斜 60 度,若 4HAU 對照孔無紅細胞凝
    集,紅細胞對照孔有紅細胞凝集,且呈明顯流淌的淚滴狀時,試驗成
    立,可判讀結果。使紅細胞凝集被完全抑制的血清最高稀釋度,判為
    血清 HI 效價。
    【注意事項】1.本品避免反復凍融使用。
    2.倍比稀釋時,吸液、吐液動作不應過快,防止污染其他孔及取
    量不準確。
    3.4HAU 應現用現配,使用時充分混勻。
    4.使用 1%雞紅細胞懸液時,應輕搖混勻。
    5.因環境溫度不同,判定結果時,可依據對照孔情況,適當調整
    作用時間。
    6.設立陰、陽性血清對照,且當陰性對照血清 HI 效價≤1:4、陽性
    對照血清 HI 效價與已知結果相比,誤差≤1 個滴度時,試驗方可成立。
    【規格】 2ml/
    【貯藏與有效期】 -15℃以下保存,有效期為 12 個月
    【包裝】 10 /
    供獸醫診斷使用

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