中海培養基應用基本知識簡說
日期:2022-02-18 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:894 次
依照培養基應用目的與要求,中海培養基應包裝在試管和燒瓶及其它適用的器皿中。培養基包裝數量不超過器皿容積的三分之二。器皿口可以用帶防潮紙墊的棉塞封好,器皿外邊務必用防水紙包好。現階段試管通常用螺旋式蓋蓋住。進行分裝時盡可能采用電動全(半)自動定量包裝機。瓊脂斜面培養基分開包裝時,分開包裝量應形成三分之二底層和三分之一斜面的量。
進行包裝的器皿應提早清洗/干燥和消毒,以利于培養基的徹底滅菌。中.海按照每個批次培養基應分別裝入裝有二十毫升培養基的小玻璃瓶中,并與該批培養基一起滅菌,以測定該批培養基的酸堿度值。
某些怕熱的糖成分,應獨立配制成百分之二十或更高的濃縮液,經過濾或分期滅菌,再用無菌技術定量添加培養基中。明膠培養基也應在較低溫度下滅菌。血液和體液/抗生素等。應依照無菌技術提取,并添加到降溫至約五十度的培養基中。瓊脂斜面培養基滅菌后需馬上取出。當它降溫到五十五至六十度時,應置于正確的斜面上,讓它自然凝固。
動物細胞生長必須遵循適用的酸堿度值,酸堿度值過高過低都將造成細胞死亡。酸堿度值的測定還能夠檢查細胞培養液的批次不同之處。中'海依照標準規定,取規定量的樣品,溶解于二十至三十度到壹升的注射用水中,向以上溶液中添加規定量的碳酸氫鈉,用與細胞培養基溶液酸堿度值相仿的兩類標準規定緩沖液校正的酸度計精確測量。
每個批次培養基準備好后,認真檢查一次。要是損壞/浸水/顏色異常、棉條被培養基污染等情況被發現,將它們挑選出來必須扔掉。并且測定培養基酸堿度值。將全部培養基放入培養箱中過夜培養,若有細菌生長則丟棄。如無菌生長或生長不良,用有關標準規定菌株接種壹兩管瓶培養基,培養一至兩天時間。其中緣故必須追查并重新接種。要是結論與之前相同,則該批培養基應被丟棄,不可以應用。
水做為培養基的主要溶劑。細胞培養基中的營養物質唯有徹底溶解于水,才可以被細胞消化吸收和消化吸收,使細胞生長增殖。因而細胞培養基有沒有溶解,中 海決定培養基有沒有透明清澈,同時直接影響到培養基的應用。這類項目是依照檢查溶解于水的細胞培養基的透明度來確認細胞培養基的透明度。通常情況下,中海生物培養基可以用一百二十一度高壓蒸汽滅菌十五分鐘左右。在眾多培養基制備辦法中,無特殊規定要求,可采用此法消毒滅菌。
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